產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱   總大腸菌群測定試劑盒   

貨       號   SZ011

單       位   份 

包       裝   10份/盒      

產(chǎn)品描述 每一盒試劑盒內(nèi)裝有10份15管組乳糖蛋白胨培養(yǎng)液。每一份15管組乳糖蛋白胨培養(yǎng)液由前排5管濃縮的雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和后排10管濃縮的單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液組成。每份產(chǎn)品測試1個樣品。

用       途  生活飲用水中總大腸菌群測定（GB/T 5750.12-2006－多管發(fā)酵法）

配套試劑  革蘭氏染色液、伊紅美藍平板（貨號：SZ021）、乳糖發(fā)酵管（貨號：SZ019）。配套試劑需要根據(jù)實際情況另外采購。

使用方法

（一）實驗準備

1.排氣泡

如果試劑盒產(chǎn)氣窗內(nèi)有氣泡，將試劑盒前后傾斜約45度，并輕敲臺面，以排除氣泡。

2.開孔

使用專用開孔器，經(jīng)酒精消毒或經(jīng)火焰消毒并冷卻后在試劑盒每個管口的封膜上穿刺開孔。                

（二）乳糖發(fā)酵試驗

1.接種方案 

接種量：15管共55.5毫升。自來水廠經(jīng)常檢驗或每天檢驗一次的，只需接種5管共50mL即可。

1.1.前排5管接種

用10毫升移液器，在試劑盒前排5個大方管內(nèi)接種水樣各10毫升。自來水廠經(jīng)常檢驗或每天檢驗一次的，樣品只需接種前排5管，每管10mL即可。

1.2.后排左邊5管接種

用1毫升移液器，在試劑盒后排左邊5管內(nèi)接種水樣各1毫升;另吸取水樣1毫升，加入含9毫升無菌水的管子內(nèi)搖勻，制成1:10的稀釋樣品。

1.3.后排右邊5管接種

用1毫升移液器，在試劑盒后排右邊5管內(nèi)接種1:10的稀釋樣品各1毫升，蓋上蓋子，置于36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24小時后，觀察結(jié)果。

2.初發(fā)酵試驗結(jié)果判斷

培養(yǎng)基變黃色，產(chǎn)氣窗內(nèi)有氣泡者為陽性管；培養(yǎng)基變黃色，產(chǎn)氣窗內(nèi)無氣泡者為可疑陽性管，否則為陰性管。

（三）分離培養(yǎng)

將陽性管和可疑陽性管內(nèi)的菌液分別接種到伊紅美藍平板上，經(jīng)36℃±1℃培養(yǎng)24小時后挑取符合特征的菌落進行革蘭氏染色和鏡檢試驗。

（四）證實實驗

將染色鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌落，接種到乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，經(jīng)36℃±1℃ 培養(yǎng)24小時。

1.乳糖蛋白胨管排氣泡

如果乳糖蛋白胨管內(nèi)的倒管中有氣泡，將乳糖蛋白胨管倒置，并前后或左右，以排除倒管內(nèi)氣泡。

2.乳糖蛋白胨管接種

將陽性管與可疑陽性管內(nèi)的菌液分別用乳糖蛋白胨管蓋子下自帶的接種環(huán)蘸取一環(huán)，接種于乳糖蛋白胨管內(nèi)，蓋緊蓋子并編號，于36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24小時后，觀察結(jié)果。

3.結(jié)果判斷

乳糖蛋白胨管經(jīng)培養(yǎng)后，培養(yǎng)基變黃色，倒管內(nèi)有氣泡者為陽性管，否則為陰性管。

（五）結(jié)果報告

根據(jù)證實試驗的乳糖蛋白胨管陽性數(shù)，查接種15管或接種5管的MPN檢索表，報告結(jié)果：單位為MPN/100mL。

以接種15管為例，前排5管共有2管陽性，后排左邊5管共有1管陽性，后排右邊5管共有1管陽性，則依據(jù)2-1-1，查接種15管的MPN表，得出結(jié)果為，9MPN/100mL。

如果是自來水廠自檢，只接種5管，則據(jù)乳糖蛋白胨管陽性數(shù)查接種5管的MPN檢索表報告結(jié)果。

如果所有乳糖蛋白胨管均為陰性，可報告大腸菌群未檢出。

說明 ● 開孔器：每次發(fā)貨時適量配置1個～2個于包裝箱內(nèi)并注明。

       ● 實驗室完成該項指標的檢測，另外需要如下配套試劑：伊紅美藍平板、革蘭氏染色液、乳糖蛋白胨管。